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自1975英国科学家César Milstein和Georges Köhler发明单克隆抗体以来，该技术的发展已经超过了40年，但总体来说这项技术跟40年前比并没有太大改进。单抗开发周期长流程也比较繁琐，尤其是一些特殊应用的单抗。常规杂交瘤单抗开发通常涉及以下步骤：
在设计抗原序列时，需要考虑其可开发性，包括溶解度、热稳定性、免疫原性等。通过贝叶斯优化等方法，可以在设计过程中综合考虑这些属性，以确保最终抗体有效性。目标抗原可以是重组蛋白、多肽或其他能够诱导免疫应答的分子。需要注意的是抗原的设计是抗体开发中至关重要的一个环节，不同的抗体公司有着不同的抗体设计思路和习惯，这些习惯往往是一脉相承的，康拓抗体在抗原设计这块有着相当丰富的行业经验，这些经验也是从数千乃至上万次抗体开发实战案例中总结出来的，有需要的可以联系我们免费咨询设计。
将抗原注射到小鼠体内，以诱导免疫系统产生针对该抗原的抗体。这是比较简单的一步，一般使用正规佐剂并按标准剂量和周期免疫都不会有太大问题；一般的蛋白抗原在经过2-3次加强免疫后，抗血清效价可以达到几万到几十万。
无论从成本还是技术含量考虑，细胞融合都是杂交瘤单抗中重要的一环，无论电融合还是化学融合现在都是主流的融合手段，且融合效率相差不大。这一步的目的是从免疫后的小鼠脾脏中分离B细胞，并与骨髓瘤细胞融合，形成能够无限增殖并产生特定单克隆抗体的杂交瘤细胞。
通过ELISA、流式细胞术等方法筛选产生所需单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆。在这里比较关键的是筛选原，筛选原必须是准确且经过严格验证的，不然最后筛到的抗体在实际应用中可能失效。一般在开发单抗时不同应用的抗体需要单独筛选，当然一株抗体同时具备多种应用属性也是比较常见的。
选择的阳性克隆通过细胞培养生产单克隆抗体，并通过蛋白质纯化技术进行提纯。
对纯化的抗体进行一系列鉴定，包括亲和力、特异性和功能性测试，以确保其适用于免疫荧光，免疫印迹甚至流式等应用。
在实际的具体检测实验中测试抗体的性能，包括固定方法、抗体稀释度、孵育时间等，以优化实验条件。经过以上流程，一个抗体算是开发完成。抗体开发细节比较多，任何一个环节出问题都能导致最后结果不理想，因此“一步一验证”，步步谨慎是康拓抗体人匠心精神的体现。
